GERALD SCHNEIDER: Avem la început o întrebare de la un student care mă cere să clarific ce am vrut să spun prin model de acțiune fixă. Îți amintești ce a fost un model de acțiune fix? Vorbeam despre comportament. Am spus că este o mișcare instinctivă. Practic, este un termen ecologic de... din zoologie. Ecologiștii din domeniul zoologiei au dat naștere acestui studiu al modelelor de comportament moștenite, bine? Oamenii au multe dintre ele și toate animalele. Tiparele lor de comportament acolo sunt destul de asemănătoare de la un membru al speciei la altul, deoarece modelul de bază este moștenit. Structurile creierului se dezvoltă sub control genetic și formează circuitele necesare acestor tipare. Ar include, la oameni, lucruri precum plânsul și zâmbetul și încruntarea, și privirea în jos când ești puțin timid și lucruri de genul. Au existat studii interculturale asupra omului. Există o carte foarte frumoasă despre ecologia umană scrisă de [INAUDIBLE], dacă cineva dintre voi este interesat. Și există și o carte foarte cunoscută precum Darwin, Charles Darwin. Și el imaginează o serie de aceste modele de comportament, ca la câini. În regulă. Mai avem ceva de spus despre aceste mecanisme celulare primitive . Am tot vorbit despre secretie. Aceasta este din ultima clasă. Acum, ar trebui să știi din test, dacă nu ți-ai amintit, din moment ce am afirmat-o în întrebare. Cum se descoperă aceste lucruri? Toate au fost descoperite prin microscopie electronică și le-am desenat imagini. Am vorbit despre toate cele șapte. BINE. Ce este exocitoza? Este doar un termen pentru secreția de către o celulă atunci când o celulă scoate ceva. Ce este endocitoza? O celulă bea... celula a băut ceva. Ambele lucruri se întâmplă într- un loc mai mult decât în ​​oricare altul, în neuroni, și acesta este la terminal, terminalul axonal, bine? Exocitoza, așa secretă neurotransmițători și veziculele se unesc cu membrană și așa mai departe. Cum știm că are loc endocitoza? Da? PUBLIC: Există și alte [INAUDIBILE].. GERALD SCHNEIDER: OK. Mecanismele de recaptare care implică receptorii noștri pot prelua neurotransmițătorii. Cum l-am putea testa experimental? Nu numai că preia neurotransmițători, putem injecta o substanță, o proteină, o enzimă. Ar putea fi fluorescent... ar putea fi un colorant fluorescent. Îl putem injecta și o substanță trasoare care este absorbită de celulă. Și apoi, dacă este preluat de celulă și se mișcă în interiorul celulei, îl vom putea vedea. Așa că facem asta cu lucruri precum peroxidaza de hrean. Îți voi arăta poze cu asta mai târziu astăzi. Este preluat de terminalele celulei. De asemenea, este preluat de corpul celular. Dar dacă îl puneți într-o regiune de terminație - să spunem că îl punem în tectul optic unde se termină retina, suntem în corpul lateral [INAUDIBIL] , în orice loc se termină retina. Dacă punem o substanță, o substanță trasoare, aceasta va fi preluată de terminale și apoi va fi transportată. Cum face asta? Ei bine, există mecanisme de transport active, îți amintești? S-a mutat înapoi la... până la corpul celulei și, astfel încât să putem privi mai târziu, dacă îi dăm puțin timp să se întâmple, va apărea în celulă [? pata. ?] BINE. Vă amintiți ce molecule sunt implicate în transportul retrograd și anterograd? Sunt două dintre ele pe care le-am menționat: kinesină și dineină. Dineina este cea implicată în transportul retrograd, procesul pe care tocmai l-am descris. BINE. Aceste procese pot mișca nu doar molecule, ci pot mișca organele. Așadar, organelele sunt transportate din corpul celular până la terminal, mici vezicule care conțin diverse lucruri. BINE. Și, de obicei, atunci când obținem transport retrograd, de asemenea, substanța este încapsulată într-o veziculă mică, într-un organel. Și asta este ceea ce de fapt se mută înapoi în corpul celular. BINE. Așa că voi vorbi acum despre modul în care aceste dinamice celulare sunt utilizate în studiile experimentale. SNC, mai ales studii anatomice în care acest proces de secționare a creierului este utilizat, astfel încât să putem privi cu un microscop. Acum, pentru a secționa creierul, trebuie să repari creierul, bine? Pentru a vedea ceva în ea, trebuie să puneți... să faceți ceva țesuturilor, pentru că creierul în sine, nu veți vedea prea multe. Puteți vedea lucruri dacă creierul a fost fixat, deoarece mielina, de exemplu, va îndoi lumina diferit față de zonele nemielinizate. Și astfel puteți distinge fascicule de fibre mielinice. Dar nu vei vedea bine celulele decât dacă le vei păta. Deci avem diferite moduri de a le colora. Sau putem injecta lucruri în ele. Vom vorbi în principal despre lucrurile pe care le injectăm astăzi, astfel încât să putem urmări accentele. Dar, în primul rând, trebuie să reparăm creierul, ceea ce înseamnă că de obicei facem asta în procesul de a ucide un animal de experiment, înlocuim sângele acestuia cu un fixativ. BINE. Este o procedură de îmbălsămare. Ceea ce au folosit fixatorii pentru prima dată au fost lucruri precum alcool, OK și anumiți acizi. Dar fixatorii care au făcut cea mai mare diferență pentru munca non-anatomică sunt aldehidele, formaldehida, inițial, iar apoi pentru microscopia electronică și alte lucruri, de asemenea, glutaraldehida. Deci, după ce creierul este fixat, se va întări într-o oarecare măsură, în funcție de fixativ. Și apoi poate fi secționat. Pentru a- l secționa, îl putem îngheța și tăia secțiuni congelate. Asta nu ne permite să tăiem secțiuni foarte subțiri. Putem reduce secțiuni groase de 15 sau 20 de microni dacă înghețăm creierul. Există câteva moduri diferite de a face asta. Puteți să-l înghețați cu gheață uscată pudră pe un microtom glisant, sau îl putem îngheța într-un criostat cu o lamă întreagă, și creier, și totul este ținut la o temperatură scăzută. Dar există și alte moduri fără a provoca îngheț. Putem încorpora creierul în ceva. Îl putem încorpora în ceară, de exemplu, încorporarea cu parafină. Și există și alte lucruri precum celoidina pe care le putem încorpora în celuloza noastră naturală. Dar să spunem acum că am injectat ceva... computerul meu este... trebuie să mă întrebe ceva, dacă e al meu. Nu știu. Poate că este unul dintre celelalte computere din apropiere de aici. BINE. Acum, am menționat pata Golgi înainte. Aceasta este o imagine a unei secțiuni care este puțin mai subțire decât se face de obicei pentru pata Golgi. Procesul a fost că a fost pregătit un bloc de țesut. Creierul este blocat în secțiuni foarte groase și colorat cu procedura argintie care va marca anumite celule. Și așa au fost produse aceste celule negre cu metoda Golgi. Această metodă Golgi particulară, care a fost modificată de Cox, deci metoda Golgi-Cox, pentru a obține o mulțime de celule și dendritele lor. Și apoi, după ce a fost făcut, creierul a fost tăiat în secțiuni mai subțiri și a fost contracolorat pentru celulele care nu funcționau prea bine. Dar puteți vedea cumva niște celule acolo în fundal. Subliniază doar că colorați doar un mic procent de celule. Și puteți vedea corpurile celulare din dendrite și puteți vedea celulele piramidale cu dendrita apicală. Puteți vedea acolo o mică celulă fără formă piramidală , o celulă granulată. Puteți distinge dendrite. În această pată specială, uneori putem vedea axonul, ca și acolo, putem vedea începutul axonului. Alteori, este puțin mai dificil. Există un început de axon. BINE. Și Cajal a fost anatomistul care a folosit asta cel mai mult, așa că a fost folosit de o serie de alți oameni. El a fost deosebit de prolific, poate, din cauza unei abilități pe care o avea pe care de fapt nu trebuia să urmărească axonii așa cum o vor face majoritatea oamenilor acum și este destul de dificil și plictisitor să urmărești în detaliu aceste accente. Ei bine, dacă nu le-a urmărit , cum a făcut-o? Stie cineva? Avea o memorie fotografică... foarte neobișnuită. Ar studia creierul pentru o perioadă lungă de timp. Ar vedea un număr imens de celule, dar studiindu-le ar fi atent la ceea ce își dorea cel mai mult să învețe în acea zi și apoi ieșea la plimbare. Și apoi se întorcea și își dădea seama ce voia cu adevărat să deseneze și le desenează cu o acuratețe remarcabilă. Când oamenii refăceau lucrurile pe care le-a studiat, ei găseau aproape aceleași lucruri. Și asta face el aici. Nu se uită prin microscop, doar desenează. BINE. Acum, una dintre metodele care-- prima metodă care a fost utilizată pe scară largă pentru trasarea experimentală a unei căi, a fost tehnica degenerării. Și sunt mai mulți dintre ei. Acum, când spun trasarea experimentală a unei căi, aceasta trebuie să fie în contrast cu privirea la material în care nu sa făcut nimic creierului, ci cu privire la un creier normal care a fost apoi fixat și colorat, să zicem, pentru axoni. Există pete care vor păta axonii și puteți vedea mănunchiuri majore de fibre și așa mai departe. Dar nu poți - sunt atât de multe accente, nu poți găsi cu adevărat -- descoperi cu siguranță unde se îndreaptă sau chiar de unde vin. În unele cazuri, cum ar fi axonii care ies din ochi, este destul de evident că au venit... de unde au venit. Au venit de undeva în retină. BINE. Dar când acești axoni ajung în zonele terminale ale creierului, poți urmări tractul până la principalele zone terminale, dar este... chiar și acolo, este dificil să vezi toate locurile în care se termină fără vreo metodă experimentală de urmărire. Și acestea sunt ceea ce noi numim metode de urmărire a tractului, bine? Metoda inițială a fost dezvoltată de Marchi. A fost pentru colorarea mielinei degenerate. BINE. Metoda Marchi... îmi pare rău, e un C-H-I acolo. A fost o problemă cu metoda Marchi. Ar putea marca o mielină degenerată, bine? Pentru asta a fost bine. Căile degenerante ale mielinei ar putea fi marcate în mod specific. Dar a avut o problemă majoră, prin aceea că mielina dispare de obicei în regiunea terminală. Deci mielina nu ajunge până la terminal [INAUDIBIL]. Deci nu poți fi niciodată absolut sigur. Adică, dacă ai fost priceput și ai fi făcut și studii Golgi și ai studiat Cajal și așa mai departe, mulți oameni care folosesc metoda Marchi s-au dovedit a avea dreptate. Metodele de degenerescenta au altele - aceasta este utilizarea tehnica generarii anterograde, pe care ar trebui sa o explic mai intai aici. Ceea ce vedeți în imaginea de aici este asta-- celula galbenă de acolo este conectată printr-un axon la o altă celulă. Totul are intrare, celula de aici și arată locul rănirii, bine? Acum, dacă aceasta este o leziune transectează axonul, OK, atunci vei avea degenerare în două direcții. Degenerarea anterogradă va fi degenerarea axonului distal de corpul celular, OK? Și vom merge... va implica degenerarea întregului axon. De obicei, primul lucru care începe să dea semne de degenerare sunt de fapt terminalele, OK? Dar atunci întregul axon va degenera, se va fragmenta, își va schimba proprietățile chimice. Și, în cele din urmă, va dispărea prin procese de fagocitoză. Acum, petele de mielină vor păta doar mielina degenerată, deci nu va ajunge la toate aceste terminale. Ai si degenerare in sens invers. Acum, ruperea axonului este mult mai lentă. Și în unele cazuri, nici măcar nu se întâmplă. Au loc apoi modificări în corpul celular. Și, de obicei, atunci când vorbim despre degenerarea retrogradă, ne referim la modificări ale corpului celular. Vei avea cromatoliză. Cromatina din celulă își va schimba distribuția, astfel încât celulele vor începe să arate diferit. În unele cazuri, celula va degenera treptat. În alte cazuri, pur și simplu se va atrofia, dar nu... nu va muri, bine? Încă o numim degenerare retrogradă. Uneori o numim atrofie retrogradă dacă celula nu moare. BINE. Dar apoi au loc schimbări în întreaga celulă care durează diferite perioade de timp. Aici, aveți degenerarea antegradă în imagine și, de asemenea, subliniază că uneori, la locul unde a fost tăiată celula, mai degrabă decât vopsirea celulei, răspunsul inițial este de fapt o încercare de regenerare, OK? Asta se întâmplă, aparent, în fiecare celulă, dar celulele variază foarte mult și cât de mult se pot regenera. BINE. Cei mai mulți dintre ei în [? SNC, ?] majoritatea dintre ei nu vor putea să-și recrească axonul. Multe dintre ele vor prezenta unele încolțiri în regiunea tăieturii, bine? Și despre asta vom vorbi mai târziu. Nauta, care a fost profesor MIT în ultima parte a carierei sale, înainte de a veni la MIT, își dădea seama de problemele cu metoda Marchi, că nu poți fi niciodată sigur că ai urmărit tracturile până la locul lor real de terminare. El a investigat diverse metode de colorare a argintului, deoarece acestea puteau colora foarte bine axonii destul de subțiri și doar axonii normali. Una dintre ele a fost o metodă dezvoltată de [? Dostoievski. ?] Îi plăcea deosebit de bine. A studiat chimia acesteia și a început să lucreze cu un bărbat din Elveția la modificarea [? Dostoievski?] pată, deci ar păta mai bine degenerarea. Inițial au venit cu o pată pe care o numim acum pata exterioară originală, care a pătat foarte bine degenerarea, dar a pătat destul de bine toți axonii normali . Așa că a fost încă destul de dificil să le aleg pe cele degenerate. Lucrarea lui cu Gygax în Elveția... îmi pare rău, acesta a fost originalul fără pată, cred, a fost înainte de Gygax, bine? Dar apoi cu Gygax, a lucrat la o metodă de suprimare a colorării axonilor normali. Și aceasta a fost o descoperire uriașă în tehnicile de trasare a tractului. Pentru că atunci când ai făcut ca acea tehnică să funcționeze bine, ai putea să faci pata și toți axonii normali s- ar păta foarte ușor, iar cei degenerați s- ar păta în continuare întunecat. Acum, felul în care a făcut asta a fost că au aplicat un agent oxidant. Țesutul normal s- ar oxida mai repede decât țesutul care se regenera. Așadar, perioada de timp în care l-au expus la agentul de oxidare a fost foarte critică și au făcut adesea teste folosind diferite perioade de timp în agentul de oxidare pentru a vedea când ar putea obține pata optimă. Pata aceea nu... nu era convins. Întotdeauna ar păta foarte bine terminalele reale, așa că a continuat să lucreze la el. Dar abia când a venit la MIT, OK, a reușit, împreună cu Robert Fink, lucrând ca tehnician în laboratorul său, să dezvolte o pată care ar fi specifică pentru axon până la terminale. Și Leonard Heimer, un anatomist suedez care tocmai venise să lucreze cu Nauta, lucra și el la aceste pete. Avea un mod ușor diferit de a face un lucru similar. Metoda lui... metoda lui Heimer a funcționat mai bine pentru hipotalamus, structurile limbice. Metoda lui Fink a funcționat mai bine pentru căile senzoriale și căile motorii. Așa că l-au publicat împreună și aceasta a devenit metoda standard pentru trasarea tractului timp de câțiva ani. Întrebare. BINE. Care este avantajul colorării axonilor degenerați. A fost o metodă de a marca un anumit tract... asta e o întrebare critică, bine? Așa că acum, gândește-te la experimentul pe care l-ai putea face, bine? Putem scoate un ochi, distrugem toți axonii care vin din retină. Toate încep să degenereze, bine? Lăsăm animalul să supraviețuiască câteva zile, așa că obținem generația, dar axonii nu au dispărut încă. Acum, aplicăm aceste pete. Să presupunem că am aplicat folosind metoda Fink-Heimer. Am rămâne în creier și am vedea că iese în evidență în negru închis acea cale axonală. Ar părea de parcă ar degenera. Ar fi fragmentat. BINE. Și am învăța să recunoaștem axonul degenerat. Dar ar fi foarte... au fost foarte ușor de văzut, pentru că acum avem o pată care este specifică pentru axonii degenerați. Ai putea face alte lucruri. Ai putea intra în creier cu un mic electrod și ai electrocuta câteva celule într-o regiune mică. BINE. Și apoi ai urmări degenerarea din acea zonă. Există întotdeauna probleme cu tehnicile de degenerare, pentru că atunci când faci o leziune în creier, omori și axonii care trec prin, cu excepția cazului în care ai vreo metodă chimică care va ucide doar celulele și nu axonii. Și există astfel de metode. Dar până când acele metode au fost dezvoltate, lucruri care ar putea ucide celulele și nu fibrele, începuseră să se dezvolte alte metode, metode care foloseau proprietățile de transport intracelular ale celulelor, bine? Deci, de exemplu, s-a constatat că enzima peroxidaza de hrean, sau HRP, așa cum am menționat mai înainte, dacă o puneți în regiunea terminalelor, va fi preluată de terminalele axonilor și transportată înapoi în corpul celular. Aici vezi o celulă aici și o celulă aici, totul... totul în negru închis acolo. Celule din retină, celule ganglionare retiniene, care au transportat HRP dintr- o zonă terminală a creierului. Acum, în acest caz particular, o altă etichetă a fost pusă și într-o altă parte a creierului. Fără galben clar. Este o moleculă fluorescentă, care este preluată și de inningurile axonilor și este transportată retrograd. Galbenul nuclear se leagă în primul rând de nucleu. Și aici, vezi o celulă dublă etichetată. Deci cele două zone care au fost injectate, ambele conțin axoni din această celulă. Și acesta este avantajul unei tehnici de colorare dublă retrogradă . Puteți afla, obține cunoștințe experimentale, despre modelele de ramificare a axonilor. Aici avem galben nuclear în nucleu și HRP în citoplasmă. Iată un alt trasor retrograd, Fluoro-Gold. Unele dintre aceste substanțe de urmărire sunt destul de scumpe pentru că este... este aur. BINE. Dar marchează foarte frumos celulele, mai mult decât galbenul nuclear sau HRP [INAUDIBIL].. Un pic mai mult ca HRP, dar chiar mai bine. Puteți vedea că are întregul corp celular plus axoni și, cel puțin, dendrite proximale. Acestea sunt, din nou, în retină. Și vezi asta, marcajul variază în intensitate. Și asta pentru că celulele mai strălucitoare am injectat mai multe terminale, au preluat mai multă substanță decât altele. Acum, în acest caz, în două regiuni terminale diferite ale retinei, am injectat niște-- într-un singur loc, am pus mărgele fluorescente. În altă zonă, punem Fluoro-Gold. BINE. Și apoi putem... pentru că moleculele fluoresc la o lungime de undă diferită, OK, am folosit filtre diferite în microscopul nostru. Putem vedea margelele fluorescente cu un filtru, iar Fluoro-Gold cu altul. Și vedem aici o celulă în mijloc care are ambele etichete. Alte celule care au doar una ca acestea, mai ales, zona injectată cu Fluoro-Gold. BINE. Așadar, știm că cel puțin unele dintre aceste celule -- și putem reprezenta dimensiunea lor și așa mai departe, și locațiile lor -- au axoni care merg la ambele structuri. Alții au un axon care merge doar către una dintre cele două structuri. Acum, peroxidaza de hrean este folosită frecvent pentru că nu numai că merge în direcția retrogradă -- a fost descoperită mai târziu -- este și o tehnică de urmărire antegradă destul de bună. Va ajunge de la corpurile celulare la axon. Acest lucru a fost descoperit atunci când metodele de vizualizare a HRP au devenit mai sensibile. Și aici, asta este de la munca din laboratorul meu. Punem HRP într-un ochi. Și ne uităm la tractul optic aici în [? tween ?] creier. Și vezi axonul [? carborizând?] în două structuri, corpurile geniculate ventral și dorsal lateral -- un pic aici, de asemenea. Și îi vedeți intrând chiar în nucleul ventrobazal, ceea ce la adult nu ar face asta. Dar la copil, ei sunt puțin mai răspândiți în conexiunile lor. Și asta am studiat aici. BINE. Toate aceste metode pe care le-am folosit, consider că variază foarte mult în ceea ce privește sensibilitatea lor. Metodele de degenerare au fost destul de bune, dar au fost foarte bune pentru unele structuri. Alte structuri, era greu de văzut, cu siguranță, dacă există cu adevărat axoni, în special zone de proiecție foarte rară. Acest lucru a fost valabil și pentru HRP, deși, HRP a fost mai sensibil. Și nu am menționat o altă metodă care a fost folosită în perioada HRP, de asemenea, foarte frecvent și a avut un mare avantaj. A evitat problema axonului de trecere și a fost marcarea radioactivă a proteinelor, a... Îmi pare rău... aminoacizi. Deci ele ar fi preluate de corpurile celulare și sintetizate în proteine. Și proteinele ar fi transportate în jos pe axoni. Deci, de ce a evitat asta problema trecerii fibrelor? Ei bine, dacă injectați aminoacizii într-o structură din creier, acesta este preluat de corpurile celulare. De asemenea, este preluat de axonii care trec prin, în special, la nodurile din jurul [INAUDIBLE], veți obține câteva. Dar nu se sintetizează - nu se produc proteine decât în ​​corpul celular. BINE. Așadar, pentru a evita problema trecerii fibrelor, și care a fost testată experimental, ați putea dovedi că nu a etichetat axonii de trecere și a etichetat doar celulele din regiunea locului de injectare. Dar atunci, cum găsim radioactivitatea? Putem eticheta cu tritiu, sa zicem, am putea folosi prolina tritiata sau leucina tritiata. Acestea erau cele comune. BINE. Și atunci ce facem? Ei bine, trebuie să așteptăm puțin și să lăsăm animalul în viață, astfel încât aminoacizii să fie luați în celule, transformați în proteine și apoi trebuie să avem timp pentru transport. Dar, să zicem, așteptați câteva zile, poate cinci zile. Și apoi a trebuit să folosim o procedură numită autoradiografie în care secționează creierul, le pui pe diapozitive -- pui secțiunile pe diapozitive. Apoi intri într-o cameră întunecată. Și pe întuneric, acoperiți diapozitivele cu emulsie fotografică și le lăsați în întuneric mult timp. Radioactivitatea expune emulsia fotografică. De obicei, am contracara acele secțiuni pentru corpurile celulare cu o colorare nissl, de obicei, astfel încât să putem vedea corpurile celulare. Și apoi, când vedeai boabele de argint în emulsia fotografică peste țesut. Deci am putea localiza unde au mers acele proteine care au fost transportate din celulele pe care le-am injectat. Acum, acea metodă a avut un alt avantaj că unele molecule, cum ar fi prolina, dacă le lăsați în... puneți mult și le lăsați suficient de mult, de fapt ar traversa sinapsa și veți obține transport transneuronal, OK? Și astfel am putea să stabilim modelul de terminare în cortexul vizual de la injectarea ochiului, chiar dacă a existat o sinapsă în talamus, bine? Deci, există o serie de avantaje ale acestor tehnici. Mai târziu, s-a descoperit că HRP va merge de fapt... transfera doar două. Tot am constatat că sensibilitatea era o problemă. Cea mai sensibilă metodă pe care am găsit-o folosește o altă metodă numită colorare imunohistochimică sau marcare, OK? Ei bine, folosim un anticorp pentru molecula pe care am introdus-o. Cel care îmi place cel mai mult pentru urmărirea în sistemul vizual este un fragment din molecula de toxină holeră. Folosim adesea lucruri destul de periculoase în laborator. Nu primim toxina [INAUDIBILĂ] completă, așa că suntem destul de în siguranță. [INAUDIBIL] subunitate a acestuia. Acest fragment de toxina holerica este preluat. Și când folosim imunohistochimia pentru a găsi acea moleculă, folosim un anticorp împotriva toxinei holerei. Mi se pare extrem de sensibil. Am reușit-- aici vă arăt o imagine în câmp luminos în care am legat anticorpul-- anticorpul secundar pe care l- am putea marca cu HRP. Dacă îl privim în câmp întunecat, îl puteți vedea aici într-o parte a corpului geniculat. Acest lucru a fost atât de sensibil pentru că ar putea păta întregul axon chiar până la terminale, nu doar terminalele. Nu le-a pătat într-un mod fragmentat, așa că arată ca imaginile Golgi. Și am reușit să arăt că retina -- cu studenții cu care lucram -- retina se proiectează către multe structuri diferite de la baza creierului, zone hipotalamice, despre care inițial nu se credea că fac parte din zona de proiecție, retină. Încă nu știm ce fac unele dintre aceste proiecții. Acum, imunofluorescența poate fi folosită pentru a marca mai multe lucruri în același timp. În acest caz, vedeți dendrita unei celule și vedeți doi markeri diferiți. Unul care marchează interiorul dendritei și altul care pare să marcheze ceva la suprafață. Cred că foloseau o proteină sinaptică specifică regiunilor sinaptice. Și puteți vedea asta dacă vă uitați la o mărire mai mare, acolo unde acestea marchează și nucleele celulelor sau al treilea anticorp. BINE. În fiecare caz, ei leagă anticorpul de un marker fluorescent. BINE. Și pentru asta, ai nevoie de un anticorp secundar. Și aceste proceduri au fost bine puse la punct și sunt cele mai comune metode acum pentru a obține marcarea sensibilă. Și, desigur, acea ultimă metodă, imunohistochimia, poate fi folosită pentru mai mult decât doar urmărirea axonilor. Puteți găsi... așa cum v-am arătat în ultima imagine, o puteți folosi pentru a găsi locația specifică a diferitelor molecule din creier. BINE. Să vorbim acum puțin despre specializările membranei. Și dacă avem timp, puțin despre activitatea endogenă. Aceasta este o ordine diferită în... decât tipărirea dvs., dar sunt aceleași subiecte. Le-am pus într-o ordine diferită, pentru că am vorbit deja despre unicitatea axonală, unicitatea membranei axonale cu canalele sale ionice dependente de tensiune, în special, pentru sodiu care ar putea duce la potențialul axonal. Aceasta este o specializare pentru iritabilitate postsinaptică. Receptorii sunt un alt exemplu de specializare. Nu am vorbit încă despre mecanismul de transducție transducția senzorială care are ca rezultat potențiale de receptor, dacă sunt celule receptore specializate, potențiale generatoare în partea dendritică a neuronului. Și v-am oferit această imagine, pentru că este o clasificare frumoasă a tipurilor majore de receptori din organisme. Acestea nu sunt singurele tipuri, bine? De exemplu, avem chemoreceptori care pot detecta oxigenul, de exemplu, în sânge. Nu ne gândim prea mult la acestea pentru că nu simțim oxigenul. Dar face parte din sistemul nostru nervos autonom. Te gândești mai mult, totuși, la gust și miros acolo unde ai celule receptori specializate și papilele gustative în limbă. Și acestea sunt conectate la terminalele axonilor senzoriali primari, de fapt, partea dendritică a neuronilor senzoriali primari. Potențialul receptorului este generat în aceste celule receptore ca răspuns la anumite substanțe chimice pe care noi... în gura noastră, bine? Și asta provoacă modificări ale proprietăților membranei aici și duce la potențiale de acțiune care încep aici, dealul axonului, și apoi merg în sistemul nervos central . În cazul mirosului, este puțin diferit, în care, epiteliul olfactiv care căptușește cavitățile noastre nazale, neuronii înșiși acționează ca receptori. BINE. Porțiunea dendritică a neuronului senzitiv primar este încorporată în mucoasa mucoasei nazale. Iar moleculele pe care le absorbim prin aer se dizolvă în acea mucoasă și stimulează anumiți receptori din neuronul senzitiv primar, care generează apoi potențiale axonale, care ajung apoi în sistemul nervos central , bulbul olfactiv nervului cranian. Apoi avem diverși mecanoreceptori, receptori care sunt specializați pentru detectarea întinderii mecanice și înțepături, OK sau vibrații. Aceasta este o parte dendritică care se termină cu un axon a unei celule din piele, cu o structură puțin specializată în jurul ei. Corpusculul pacinian este bun pentru detectarea modificărilor fine de presiune . Avem, de asemenea, terminații nervoase libere în piele care răspund la deformarea pielii. Avem terminații, terminații senzoriale, în mușchi care detectează întinderea musculară, iar altele în articulații, tensiunea articulațiilor noastre. Acestea sunt toate exemple de mecanoreceptor. Și încă unul este în ureche, bine? Acolo unde există celule specializate într-o membrană, membrana bazilară în aer, care atunci când membrana bazilară vibrează, vibrația este detectată de acești neuroni senzoriali, deoarece celulele senzoriale, mai degrabă decât neuronii, în special, celulele senzoriale, care apoi provoacă o potențial receptor care afectează terminațiile primare ale neuronului senzorial din cohlee. Și, în sfârșit, avem-- în sistemul vizual, avem capacitatea de a detecta fotoni, care este un alt tip de lucru și ne poate arăta că aceasta este o caracterizare a ce fel de lucru se întâmplă cu chemorecepția, mecanoreceptorul... receptori în recepția foto. În cazul recepției foto, pe care nu am terminat-o anterior, aveți o membrană specializată în interiorul celulei care răspunde la fotoni și are ca rezultat o eliberare moleculară care afectează un receptor membranar, care apoi la rândul său afectează canalul ionic. Tot ce face este să schimbe cantitatea de curent care curge prin membrană. Nu provoacă potențiale axonale. BINE. În retina noastră, primară, rutele și conurile, celulele receptorilor își schimbă potențialele de membrană ca răspuns la protoni, dar nu generează de fapt potențiale axonale. Și asta este adevărat și pentru alte celule din retină. Este adevărat pentru unele celule din bulbul olfactiv. În cazul mecanoreceptorilor, ca răspuns la întinderea prin deformare sau la mișcarea unui fel de membrană, puteți auzi că arată pur și simplu un canal ionic întins deschis. Probabil că nu este ceea ce se întâmplă de fapt. Probabil că sunt... schimbarea mecanică a membranei are ca rezultat modificări ale proteinelor. Și atunci când aceste proteine ​​își schimbă conformația, obțineți un flux de ioni prin membrană. Cazul chemoreceptorilor, de obicei, pare a fi ca receptorii metabotropi despre care am vorbit înainte. Legarea este de o moleculă specifică, care apoi, la rândul său, afectează un receptor din apropiere. Vreau să spun puțin mai multe despre activitatea endogenă, dar va trebui să fac asta la începutul următoarei ore.